طقم استخراج الحمض النووي السريع للبكتيريا والفطريات والميكوبلازما | 40 دقيقة | خلية يوكون

• التوافق الواسع: مصمم لاستخراج خطوة واحدة متوافقة مع مجموعات الكشف البكتيرية والفطرية والكشف عن الميكوبلازما ، مما يتيح الوظيفة الثلاثية لاختبار العقم.

  
  

• حساسية عالية: عند إقرانها مع مجموعة الكشف عن الميكوبلازما ، تحقق حدود الكشف أقل من 10 CFU/ML.

• التركيب المبسط: دمج مكونات تحلل متعددة في كواشات مبسطة (مخزن مؤقت لاستخراج الحمض النووي 1 و 2) ، مما يقلل من الخطوات التشغيلية ومخاطر التلوث أثناء الاستخراج.

• سير العمل السريع: تكمل عملية ثلاث خطوات استخراج الحمض النووي في أقل من 40 دقيقة ، مثالية للتطبيقات عالية الإنتاجية.

• التحكم في التلوث: حزم الامتداد الاختيارية تقضي على التداخل ، مما يضمن الكشف الحصري للكائنات الحية الدقيقة القابلة للحياة.

• معالجة العينات القوية: تقوم بمعالجة عينات متنوعة ، من معلقات البكتيريا البسيطة إلى خلائط ثقافة الخلايا المعقدة (على سبيل المثال ، MSC ، NK ، HEK293 خلايا). تدعم ما يصل إلى 5 × 10⁷ خلايا/مل في الاستعدادات الخلوية.

• كفاءة الاستخراج المتفوقة: تزيل طريقة التحلل الحراري الاعتماد على الخرز المغناطيسي أو الأنظمة القائمة على الأعمدة ، مما يحقق عوائد حمض نووي أعلى. يضع 2-3 × حساسية أعلى مقارنة بطرق الخرزة/العمود المغناطيسي التقليدية عند إقرانها مع مجموعات qPCR.

س: كيف تتجنب إيجابيات كاذبة أثناء الكشف؟

ج: أولاً ، قم بتنفيذ الرقابة البيئية لمنع تلوث الأحماض البكتيرية أو النووية في منطقة التشغيل. من الناحية المثالية ، تأكد من أن غرفة الاستخراج خالية من تلوث الأحماض الميكروبية والنووية ، ويجب أن تكون جميع مناطق عمل التشغيل معقمة وخالية من شظايا الحمض النووي. ثانياً ، يجب أن تكون جميع المواد الاستهلاكية التجريبية المستخدمة معقمة وخالية من شظايا الحمض النووي ؛ إذا كان غير مؤكد ، تلقائية لهم قبل الاستخدام. أخيرًا ، يجب على المشغلين اتباع إجراءات معقمة بشكل صارم طوال العملية ، من أخذ العينات إلى الاستخراج إلى إعداد نظام الكشف ، لتجنب إدخال التلوث بسبب التعامل غير السليم.

س: يترسب الأبيض في أسفل الأنبوب بعد الطرد المركزي - هل يؤثر ذلك على الاستخراج؟

ج: وجود ترسب أبيض عمومًا له سببان محتملان:

1. تلوث بكتيري كبير في العينة ، حيث تشكل كمية كبيرة من البكتيريا بيليه مرئي بعد الطرد المركزي.

2. الحطام الخلوي المتبقي في خلائط ثقافة الخلايا أو الاستعدادات الخلوية ، والتي تظل بعد إجراءات إزالة الخلايا القياسية وتستقر في القاع أثناء الطرد المركزي.

   كلا السيناريوهين طبيعيين ولا يؤثران على نتائج الاستخراج.

س: لماذا تفشل المرجع الداخلي في التضخيم بعد استخراج الحمض النووي ، وكيفية حله؟

ج: هناك سببان محتملان لفشل المرجع الداخلي في التضخيم:

1. 
   

   الحمل البكتيري المفرط: كثافة مضان قناة الجينات المستهدفة قوية للغاية ، مما يؤدي إلى قمع تفاعل مضان للقناة المرجعية الداخلية. هذا لا يؤثر على تفسير النتائج.

2. 
   

   عينات معقدة مع مثبطات متبقية: يحتوي محلول الحمض النووي على مستويات عالية من المواد المثبطة.

   لحل هذه المشكلة ، قم بتخفيف محلول الحمض النووي 2-10 × مع الماء المنقى عالي الضغط قبل تحميله في تفاعل PCR.